Набір діагностичний «Biocore® Influenza A/B» призначений для виявлення РНК вірусів грипу людини типів А (Influenza virus A) і В (Influenza virus В) методом полімеразної ланцюгової реакції зі зворотною транскрипцією в режимі реального часу (ЗТ-ПЛР-РЧ, rRT-PCR).
Принцип роботи набору
Діагностикуми «Biocore® Influenza A/B» базуються на TaqMan-технології методу ПЛР у реальному часі (ПЛР-РЧ, Real-Time PCR). Застосування оптимальної комбінації реагентики, а також власний дизайн олігонуклеотидних праймерів та зондів дозволяє досягти високої чутливості та специфічності.
Набір «Biocore® Influenza A/B» має однопробірковий одностадійний формат, без окремого етапу синтезу кДНК на матриці вірусної РНК. Етап зворотної транскрипції (ЗТ) відбувається в реакційній суміші безпосередньо перед стартом полімеразної ланцюгової реакції (ПЛР). Для запобігання виникнення хибно-позитивних результатів внаслідок перехресної контамінації, а також контролю виділення РНК і проходження ЗТ-ПЛР-РЧ реакції, в наборі використовуються урацил-ДНК-глікозилаза (УДГ, UDG) та внутрішній ендогенний контроль (ВК – ген RNase P людини).
«Biocore® Influenza A/B» дає змогу одночасно визначати три мішені:
- вірус грипу В (IBV)
- вірус грипу А (IAV)
- ендогенну контрольну РНК (ВК – внутрішній позитивний контроль), що є унікальною для людини
Діагностикуми «Biocore® Influenza A/B» валідовано для використання на ампліфікаторах з системою детекції в режимі реального часу:
- QuantStudio™ 5 (Applied Biosystems, США),
- Rotor-Gene Q (Qiagen GmbH, Німеччина),
- CFX96™ (Bio-Rad, США).
Склад набору
Набір «Biocore® Influenza A/B» розрахований на 100 реакцій об’ємом 20 мкл. До складу набору входять такі компоненти:
| ПЛР-РЧ суміш (4x) | 1 пробірка 0,5 мл |
| Суміш праймерів та зондів (2х) | 1 пробірка 1,0 мл |
| НКЗ (негативний контрольний зразок) | 1 пробірка 0,15 мл |
| ПКЗ (позитивний контрольний зразок) | 1 пробірка 0,15 мл |