Набор диагностический «Biocore® Influenza A/B» предназначен для выявления РНК вирусов гриппа человека типов А (Influenza virus A) и В (Influenza virus В) методом полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ, rRT-PCR).
Принцип работы набора
Диагностикумы «Biocore® Influenza A/B» базируются на TaqMan-технологии метода ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ, Real-Time PCR). Применение оптимальной комбинации реагентов, а также собственный дизайн олигонуклеотидных праймеров и зондов позволяет достичь высокой чувствительности и специфичности. Набор «Biocore® Influenza A/B» имеет однопробирочный одностадийный формат, без отдельного этапа синтеза кДНК на матрице вирусной РНК. Этап обратной транскрипции (ОТ) происходит в реакционной смеси непосредственно перед стартом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Для предотвращения возникновения ложноположительных результатов вследствие перекрестной контаминации, а также контроля выделения РНК и прохождения ОТ-ПЦР-РВ реакции, в наборе используются урацил-ДНК-гликозилаза (УДГ, UDG) и внутренний эндогенный контроль (ВК — ген RNase P человека) .
«Biocore® Influenza A/B» позволяет одновременно определять три мишени:
- вирус гриппа В (IBV)
- вирус гриппа А (IAV)
- эндогенную контрольную РНК (ВК – внутренний положительный контроль), которая является уникальной для человека
Диагностикумы «Biocore® Influenza A/B» валидированы для использования на амплификаторах с системой детекции в режиме реального времени:
- QuantStudio™ 5 (Applied Biosystems, США),
- Rotor-Gene Q (Qiagen GmbH, Германия),
- CFX96™ (Bio-Rad, США).
Состав набора
Набор «Biocore® Influenza A/B» рассчитан на 100 реакций объемом 20 мкл. В состав набора входят следующие компоненты:
| ПЦР-РВ смесь (4x) | 1 пробирка 0,5 мл |
| Смесь праймеров и зондов (2х) | 1 пробирка 1,0 мл |
| НКО (негативный контрольный образец) | 1 пробирка 0,15 мл |
| ПКО (позитивный контрольный образец) | 1 пробирка 0,15 мл |