Пообщайтесь с нашим техническим специалистом

Мы здесь, чтобы оперативно ответить на ваши вопросы и помочь вам получить максимальную пользу от пользования нашими продуктами. Выбирайте любой удобный способ связаться со службой поддержки Биокор Текнолоджи.Обирайте будь-який зручний спосіб зв’язатися зі службою підтримки Біокор Текнолоджі.

 

Напишите нам

Выбирайте удобный способ для оперативного ответа
+38 (067) 552 48 14 support@biocor-tech.com

вайбертелеграммВотсап

Оставьте запрос здесь

И мы с вами свяжемся

    Отправляя эту форму, вы даете согласие на хранение и обработку ваших персональных данных ООО «Биокор Текнолоджи»

    Вопросы относительно наборов реагентов для выделения нуклеиновых кислот

    Из какого биоматериала можно осуществить экстракцию нуклеиновых кислот наборами реагентов Biocore® Nucleo-M, Biocore® SpinFood DNA-50, Biocore® MagFood DNA-50?

    С помощью набора реагентов Biocore® Nucleo-M можно осуществить экстракцию из образцов плазмы крови, сыворотки крови, а также мазков из верхних и нижних дыхательных путей, конъюнктивального секрета, спермы, секрета простаты, соскобов из цервикального канала и уретры, выделений влагалища, соскобов из язвенно-эрозивных элементов, кала.

    Наборы реагентов SpinFood DNA-50 и MagFood DNA-50 предназначены для экстракции образцов из растительного материала, продуктов питания и пищевого сырья растительного происхождения.

    Возможно ли осуществлять экстракцию нуклеиновых кислот из биоматериала, которого нет в перечне в инстукции к набору (-ам)?

    Производитель рекомендует осуществлять экстракцию нуклеиновых кислот исключительно из перечня биоматериала, который приведен в инстукции к набору (-ам).

    Если интересующий Вас биоматериал отсутствует в инструкции к набору — Вы можете написать письмо-обращение в техническую поддержку ООО «Биокор Текнолоджи ЛТД» с расширенным изложением Вашего запроса.

    Какие виды нуклеиновых кислот можно выделить с помощью наборов реагентов Nucleo-М, SpinFood DNA-50, MagFood DNA-50?

    Набор реагентов Nucleo-М предназначен для экстракции тотальной РНК/ДНК.

    Наборы реагентов SpinFood DNA-50 и MagFood DNA-50 предназначены для экстракции тотальной ДНК.

    Какова продолжительность экстракции нуклеиновых кислот при использовании наборов реагентов Nucleo-М, SpinFood DNA-50, MagFood DNA-50?
    Процесс экстракции нуклеиновых кислот набором реагентов Nucleo-М длится примерно 30 мин, наборами SpinFood DNA-50 и MagFood DNA-50 — 50-60 мин.
    Какой объем элюции используется при применении наборов реагентов Nucleo-М/ SpinFood DNA-50/MagFood DNA-50?
    При использовании набора реагентов Nucleo-М объем элюции составляет 50 мкл, наборов SpinFood DNA-50/MagFood DNA-50 — 100 мкл.
    Какая оптимальная температура и срок хранения выделенных нуклеиновых кислот?

    ДНК выделенная с помощью наборов реагентов Nucleo-М/SpinFood DNA-50/MagFood DNA-50 может храниться в течение 8 часов при температуре 0 °С, до 1 недели при температуре ≤ -18 °С и более длительное хранение при температуре -70 °С.

    РНК выделенная с помощью набора реагентов Nucleo-М может храниться в течение одной недели при температуре -20 °С и более длительное хранение при температуре ≤ -70 °С.

    Вопросы относительно амплификационных наборов

    Какие методы экстракции рекомендованы для использования амплификационных наборов?

    Для использования диагностических наборов производства ООО «Биокор Текнолоджи ЛТД» экстракцию ДНК/РНК из биологического материала рекомендуется проводить с помощью наборов реагентов Biocore® Nucleo-M (CM-NA203-100/500/1000), MagMAX™ Viral / Pathogen NA Isolation Kit (Applied Biosystems™) и NucleoMag® Virus kit RNA/DNA Isolation (MACHEREY-NAGEL).

    Для использования тест-систем для исследования ГМО рекомендуется использовать наборы для выделения геномной ДНК из растительного материала (Biocore® SpinFood DNA-50, Biocore® MagFood DNA-50).

    Однако, не исключено использование других коммерческих наборов предназначенных для экстракции ДНК/РНК из соответствующего биологического материала.

    Есть ли особенности приготовления реакционной смеси?
    Обязательным этапом проведения ПЦР с использованием наборов производства ООО «Биокор Текнолоджи ЛТД» является приготовление реакционной смеси в соответствии с количеством исследуемых образцов, НКЗ, ПКЗ, СЗ и тому подобное. Мы настоятельно рекомендуем готовить реакционную смесь исходя из количества исследуемых образцов, а не вносить компоненты (ПЦР-РЦ смесь, смесь праймеров и зондов (2х), Taq ДНК-полимеразу, ЗТ-ПЦР-РЦ смесь (4х)) отдельно.
    Включают ли наборы внутренний контроль?

    С целью контроля прохождения этапа выделения и амплификации в диагностических наборах предусмотрен внутриклеточный контроль — рибонуклеаза Р (RNase P).

    В наборах для определения генетически модифицированных организмов есть следующие внутриклеточные контроли, в зависимости от растительного материала:

    • ген лектина (Lec) — для сои;
    • ген алкогольдегидрогеназы (Adh1) — для кукурузы;
    • ген круциферина (Cru) — для рапса;
    • ген chlDNA — для всех растений.
    Какие амплификаторы подходят для использования диагностических наборов?
    Диагностические наборы и наборы для определения ГМО валидированы для использования на амплификаторах с системой детекции в режиме реального времени: QuantStudioTM 5 (Applied Biosystems, США), Rotor-Gene Q (Qiagen GmbH, Германия), CFX 96TM (Bio-Rad, США).
    Как осуществлять настройку пороговой и базовой линии?

    Для амплификационных наборов производства ООО «Биокор Текнолоджи ЛТД» применяется автоматическая настройка пороговой линии каждого канала детекции для линейки приборов QuantStudioTM 5 (Applied Biosystems, США), Rotor-Gene Q (Qiagen GmbH, Германия), CFX 96TM (Bio-Rad, США).

    При необходимости пороговую линию можно выставить в ручном режиме. Для этого необходимо переместить пороговую линию на начало экспоненциальной фазы в случае линейного графика или посередине экспоненциальной фазы на логарифмическом графике (Рис. 1).

    Базовую линию прибор также настраивает автоматически. При наличии сильных шумов базовую линию необходимо настроить вручную. Для этого необходимо задать конец базовой линии за 5 циклов до пересечения с пороговой линией, а начало — за 12 циклов от конца базовой линии.

    Рис. 2 Построение базовой линии в ручном режиме

    Рис. 2 Построение базовой линии в ручном режиме

    Рис. 1 Построение пороговой линии в ручном режиме

    Рис. 1 Построение пороговой линии в ручном режиме

    Что делать, если значения НКЗ не соответствуют требованиям инструкции?
    При наличии кривых амплификации в НКЗ результаты всей постановки считаются невалидными и требуют повторного проведения исследования с этапа амплификации.
    Что делать, если отсутствует сигнал ПКЗ/СЗ?
    При отсутствии флуоресцентного сигнала ПКЗ/СЗ рекомендуется проверить все этапы приготовления реакционной смеси, правильного внесения ПКЗ/СЗ и провести повторное исследование.
    Что делать, если значения калибровочной кривой (Efficiency 90-110%, R2 0.98-1, -3.6 ≥ Slope ≥ -3.3) не соответствуют заданным параметрам?
    Отклонения значений Efficiency, R2, Slope свидетельствуют об ошибке при десятикратных разведениях СЗ или неточном дозировании СЗ/реакционной смеси. В таком случае рекомендуется сделать новые десятикратные разведения и повторить эксперимент.
    Какие рекомендуемые условия хранения для стабильной работы диагностических тест-систем?
    Для стабильной работы диагностических наборов мы рекомендуем хранить компоненты набора при температуре минус 18-24 °С, за исключением ПКЗ, СЗ и раствора (-ов) для разведения СЗ, которые хранятся при температуре плюс 4-8 °С после первого размораживания.