Набор диагностический «Biocore® HIV» предназначен для определения РНК вируса иммунодефицита человека 1 и 2 типов (human immunodeficiency virus 1 і 2), который вызывает СПИД у человека, методом полимеразной цепной реакций с обратной транскрипцией в режиме реального времени (ОТ-ПЦР-РВ, rRT-PCR).
Принцип действия набора
Биологическим материалом для экстракции РНК служат образцы крови, плазмы, сыроватки и тканей человека. Набор «Biocore® HIV» имеет однопробирковый одностадийный формат, без отдельного этапа синтеза кДНК на матрице вирусной РНК.
Этап обратной транскрипции (ОТ) происходит в реакционной смеси и непосредственно перед стартом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Проведение анализа основывается на TaqMan-технологии метода ПЦР-РВ. Для предотвращения возникновения ложнопозитивных результатов вследствии перекрестной контаминации, а также контроля выделения РНК и прохождения ОТ-ПЦР-РВ реакции, в Наборе используются урацил-ДНК-нликозилаза (УДГ, UDG) и внутренний эндогенный контроль (ВК – ген RNase P людини).
Набор «Biocore® HIV» дает возможность одновременно определять три мишени:
- вирус иммунодефицита человека типа I, ВИЧ-1
- вирус иммунодефицита человека типа II, ВІЛ-2
- эндогенную контрольную РНК ( ВК – внутренний позитивный контроль), которая уникальна для человека.
Диагностикумы «Biocore® HIV» валидированы для использования на амплификаторах с системой детекции в режиме реального времени:
- QuantStudio™ 5 (Applied Biosystems, США),
- Rotor-Gene Q (Qiagen GmbH, Германия),
- CFX96™ (Bio-Rad, США).
Состав набора
Набор «Biocore® HIV» рассчитан на 100 реакций объемом 20 мкл. В состав Набора входят такие компоненты:
ПЦР-РВ смесь (4х) | 1 пробирка 0,50 мл |
смесь праймеров и зондов (2х) | 1 пробирка 1,00 мл |
НКЗ (негативный контрольный образец) | 1 пробирка 0,15 мл |
ПКЗ (позитивный контрольный образец) | 1 пробирка 0,15 мл |